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熒光顯微鏡的注意事項

更新時間:2021-01-05      點擊次數(shù):1729

注意事項

 

(1)嚴格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作,不要隨意改變程序。
(2)應在暗室中進行檢查。進入暗室后,接上電源,點燃超高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強光穩(wěn)定后,眼睛*適應暗室,再開始觀察標本。
(3)防止紫外線對眼睛的損害,在調(diào)整光源時應戴上防護眼鏡。
(4)檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;
(5)熒光顯微鏡光源壽命有限,標本應集中檢查,以節(jié)省時間,保護光源。天熱時,應加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時,須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應避免數(shù)次點燃光源。
(6)標本染色后立即觀察,因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時間,防止封裱劑蒸發(fā)。長時間的激發(fā)光照射標本,會使得熒光衰減和消失現(xiàn)象,故應盡可能縮短照射時間。暫時不觀察時可用擋光板遮蓋激發(fā)光。
(7)標本觀察時候應采用無熒光油,應避免眼睛直視紫外光源。
(8)電源應安裝穩(wěn)壓器,電壓不穩(wěn)會降低熒光燈的壽命。
熒光顯微鏡和普通光學顯微鏡有以下的區(qū)別:
1.照明方式通常為落射式,即光源通過物鏡投射于樣品上;
2.光源為紫外光,波長較短,分辨力高于普通顯微鏡;
3.有兩個特殊的濾光片,光源前的用以濾除可見光,目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線,用以保護人目。
熒光顯微鏡也是光學顯微鏡的一種,主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。
熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長的光激發(fā)標本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標本的熒光圖像。
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